Ваш браузер устарел. Рекомендуем обновить его до последней версии.

__________________________________________________________________________

УВАЖАЕМЫЕ КОЛЛЕГИ! ОБРАЩАЕМ ВАШЕ ВНИМАНИЕ, ЧТО ПОЗИЦИЯ ОРГАНИЗАТОРОВ ДАННОГО РЕСУРСА МОЖЕТ НЕ СОВПАДАТЬ С МНЕНИЕМ СТОРОННИХ АВТОРОВ, МАТЕРИАЛЫ КОТОРЫХ ПУБЛИКУЮТСЯ НА САЙТЕ. ДЛЯ ОБСУЖДЕНИЯ ПОДОБНЫХ МАТЕРИАЛОВ ПРОСЬБА ВЫСЫЛАТЬ ВОПРОСЫ, ПРЕДЛОЖЕНИЯ, ЗАМЕЧАНИЯ ПО э-почте: e_artem@mail.ru

___________________________________________________________________________

СОП по аналитике

Пример стандартной операционной процедуры по планированию качества количественного метода исследования.

 

Используя данный пример, Вы можете разработать СОП по количественным методам исследований.

 

Название Учреждения

Система менеджмента качества

Стандартная операционная процедура

Этапы планирования качества количественных методов исследований в лаборатории на примере определения общей амилазы в сыворотке крови

СОП  БХ-03-2014

Издание 1

Дата введения

Лист 1 из 13

 

Название Учреждения

Вид документа

Стандартная операционная процедура (СОП)

 

Издание

№ 1

Запись в Едином реестре документации лаборатории

СОП-БХ-03-2014

Экземпляр

1

Общее количество страниц

 

Введена в действие

 

 

Срок действия

 2 года

Название документа

Этапы планирования качества количественных методов исследований в лаборатории на примере определения общей амилазы в сыворотке крови

 

 

ФИО

Должность

Подпись

Дата

Разработал:

 

 

 

 

Согласовано:

 

 

 

 

 

Содержание

 

Наименование

Стр.

1

Область применения

3

2

Нормативные ссылки

3

3

Выбор аналитического метода

3

4

Подтверждение спецификаций производителя (верификация) аналитического метода - определение общей амилазы в сыворотке с использованием протокола, разработанного на основе CLSI EP15-A2 «User Verification of Performance for Precision and Trueness; Approved Guideline-Second Edition»

4

5

Предварительная оценка достигнутого качества на основе данных по биологической вариации

6

6

Установление требований к аналитическому качеству метода определения общей амилазы в сыворотке крови на основе данных по биологической вариации

7

7

Алгоритм определения требований к аналитическому качеству количественных методов исследований в лаборатории           

7

8

Оценка результатов сигмаметрии и планирование проведения ВКК

9

9

Выбор системы внешней оценки качества (ВОК).

9

10

Проведение исследование биоматериала на аналитической системе.

9

11

Выдача результатов

9

 

Приложение № 1 Верификационный протокол согласно CLSI EP15-A2 общей амилазы на биохимическом модуле С 501 анализатора С6000 фирмы Roche

10

 

Приложение № 2 Три уровня требований к аналитическому качеству на основе биологической вариации

11

 

Приложение № 3 Мультиправила Вестгарда

12

 

Приложение № 4 Лист ознакомления, лист рассылки

13

 

 

 1.Область применения

 

 Настоящая  стандартная операционная процедура (далее- СОП) описывает алгоритм планирования качества количественного метода исследования общей амилазы в сыворотке крови на модульной платформе cobas 6000, биохимическом модуле  с501 фирмы Roche.

   Настоящая СОП предназначена для врачей клинической лабораторной              диагностики.

 

 2. Нормативные ссылки

 

  1. ISO 15189:2012 «Лаборатории медицинские. Требования к качеству и компетентности»
  2. http://www.westgard.com/biodatabase1.htm. Дата обращения 10.08.2014
  3. http://15189.ru/data/documents/MEDxChart.xls
  4. МР «Планирование аналитического качества количественных лабораторных исследований с использованием коммерческих контрольных материалов», М.2013, И.А. Арефьева, М.М. Федорова, А.В. Мошкин
  5. Приказ № 45 от 07.02.2000 г «О системе мер по повышению качества клинических лабораторных исследований в учреждениях здравоохранения Российской Федерации».
  6.  ГОСТ Р 53133.2-2008 «Контроль качества клинических лабораторных исследований. Часть 2.  Правила проведения внутрилабораторного контроля качества количественных методов клинических лабораторных исследований с использованием контрольных материалов».
  7. Инструкция к реагенту общая амилаза (AMYL2) фирмы Roche, каталожный номер № 03183742 122.
  8. А. В. Мошкин, В. В. Долгов «Обеспечение качества в клинической лабораторной диагностике», М.2004,-с.117-118

 

            3. Выбор аналитического метода.

         

3.1 На первом этапе планирования аналитического качества необходимо выбрать аналитический метод исследования аналита у производителя, оценив его характеристики:

 

- АППЛИКАЦИОННЫЕ (типы анализируемых образцов-сыворотка, данный тест возможно выполнять на модульной платформе cobas 6000, биохимическом модуле  с501 в соответствии с его техническими возможностями, специально обученнного персонала  для выполнения данного теста  не требуется);

 

-МЕТОДОЛОГИЧЕСКИЕ (метод измерения-ферментативный колориметрический в соответствии со стандартами IFCC (International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine, Международная федерация клинической химии и лабораторной медицины), реакция протекает при 37оС, для калибровки прибора используется универсальный калибратор CFAS, каталожный номер 10759350 190. Калибратор прослеживаем к мастер калибратору фирмы Roche.

 

-РАБОЧИЕ (нижний предел обнаружения - 3Е/л, диапазон измерений          3-1500 Е/л, межсерийная воспроизводимость теста, заявленная производителем, с применением контрольных материалов 1,3-1,5%, интерференция: иктеричность не оказывает значимого влияния на результаты до 60 индекса иктеричности, гемолиз-до 500 индекса гемолиза, липемия-до 1500 индекса липемии).

 

Данные характеристики аналитического метода определения общей амилазы в сыворотке крои удовлетворяют потребностям лаборатории.

 

3.2 Данный метод необходимо адаптировать в прибор через систему cobas LINK. Для этого необходимо зайти  в меню «UTILITY» - «APPLICATION» -«SERCH» - «AMYL2» - «DOWNLOAD». Затем провести адаптацию калибратора и контрольного материала: зайти в меню «Calibration» -«SERCH» - «CFAS» -   «DOWNLOAD» - «QC» - «SERCH» - «PPU, PNU» -   «DOWNLOAD».

 

4. Подтверждение спецификаций производителя (верификация) аналитического метода - определение общей амилазы в сыворотке с использованием протокола, разработанного на основе CLSIEP15-A2 «UserVerificationofPerformanceforPrecisionandTrueness; ApprovedGuideline-SecondEdition»

                           Протокол EP15-A2 необходимо скачать в виде таблицы Exсelс сайта 15189.ru

 

                 4.1 Ежедневно в течение 5 рабочих дней проводить в трех повторах измерение 2-х уровнего контрольного материала фирмы Roche (Precinorm U, Precipath U) с интервалом не менее 2-х часов в одной аналитической серии. Если, вследствие проведения внутрилабораторного контроля качества (ВКК) или по техническим причинам аналитическая серия была отклонена, то необходимо удалить данные и провести новую аналитическую серию.

 

      4.2 В процессе выполнения протокола также необходимо проводить ежедневный ВКК в соответствии с приказом № 45 от 07.02.2000 г «О системе мер по повышению качества клинических лабораторных исследований в учреждениях здравоохранения Российской Федерации» и ГОСТ Р 53133-2008 «Контроль качества клинических лабораторных исследований. Правила проведения внутрилабораторного контроля качества количественных методов клинических лабораторных исследований с использованием контрольных материалов».

 

      4.3 Все полученные результаты измерений контрольного материала внести в протокол стандарта EP5-A2, указав в столбце «Date»-даты проведения исследования, в столбцах «Rep1», ««Rep2», ««Rep3»  внести значения ежедневных измерений контрольного материала в трех повторах. Протокол верификации приведен в приложении № 1.

 

4.4 В нижней части протокола напротив коэффициента вариации (CV) внести значение межсерийного СV(%), а напротив среднего значения «mean», указать среднее значение контрольного материала производителя. Данные CV(%) и среднее значение контрольного материала указано в инструкции производителя для определения общей амилазы в сыворотке крови. См. таблицу № 1

 

Таблица № 1

Межсерийная воспроизводимость (Intermediate precision) и среднее значение (mean) контрольного материала, указанные в инструкции производителя фирмы Roche для определения общей амилазы в сыворотке крови.

 

Название контрольного материала

Среднее значение контрольного материала (mean), U/L

СV, %

Precinorm U

84

1,3

Precipath U

184

1,5

 

      4.4 Внеся в протокол выше перечисленные данные мы получили, что «верификационное значение» (VV) больше лабораторного SD (Laboratory CV). Соответственно, наш метод определения общей амилазы в сыворотке крови был верифицирован, поэтому лаборатория имеет полное право выдавать результаты исследований общей амилазы в сыворотке крови своим клиентам.

 

      4.5 После подтверждения спецификаций производителя определения общей амилазы в сыворотке крови необходимо переходить к установлению требований к качеству данного аналита.

 

5. Предварительная оценка достигнутого качества на основе данных по биологической вариации.

 

         5.1 На первом этапе установления требований к качеству аналита необходимо набрать установочную серию из 20 измерений согласно приказу № 45 от 07.02.2000 г «О системе мер по повышению качества клинических лабораторных исследований в учреждениях здравоохранения Российской Федерации», но для объективной оценки работы аналитической системы необходимо набрать не менее 50 контрольных измерений в зоне принятия клинического решения.

 

5.2 На основе полученных данных рассчитать CV(%) по формуле CV(%):

, где:

S-среднеквадратичное отклонение;

x-среднее арифметическое значение результатов n измерений .

Наше CV=135/50=2,7%.

 

   5.3 Рассчитать свою общую аналитическую ошибку (TЕa) по формуле: TEa=Bias+1,96*CV(%), где:

    Bias-смещение, предоставленное программой ВОК (EQAS).

    Наша TEa=0,6+1,96*2,7%=9,54%.

 

5.4 Рассчитать количество сигм для метода определения общей амилазы в сыворотке крови по формуле: Sigma=(TEa-B)/CV. Для автоматического расчета сигмы на сайте http://15189.ru/data/documents/MEDxChart.xls представлена таблица «Normalized Metod Evalution Desion Chart», в которую в столбец «F» необходимо внести свое значение CV(%), полученное при проведении ВКК и в столбец «G» внести смещение, полученное из ВОК.

Наша сигма=(14,6-0,6)/2,7=5,18. Данные ТEa указаны на сайте: http://www.westgard.com/biodatabase1.htm.

 

        6. Установление требований к аналитическому качеству метода определения общей амилазы в сыворотке крови на основе данных по биологической вариации

 

 6.1. Внесем в таблицу № 2 полученные статистические характеристики при проведении ВКК и сравним их с мировыми рекомендациями по биологической вариации Ricos C, представленные на сайте : http://www.westgard.com/biodatabase1.htm.

 

Таблица № 2

Сравнительная таблица достигнутого аналитического качества определения общей амилазы в сыворотке крови с мировыми рекомендациями базы данных Ricos C по биологической вариации.

 

Название аналита

Оценка достигнутого качества

Требования Ricos  по биологической вариации

CV(%)

B(%)

TEa(%)

Sigma

CVi(%)

B(%)

TEa(%)

 

Общая амилаза в сыворотке

2,7

0,6

9,54

9,54

4,4

7,4

14,6

CVi - внутрииндивидуальная биологическая вариация

 

        Достигнутое аналитическое качество определения общей амилазы в сыворотке крови соответствует мировым требованиям Ricos по биологической вариации.

 

       7.0 Алгоритм определения требований к аналитическому качеству количественных методов исследований в лаборатории.

 

7.1 Проведя предварительную оценку достигнутого в лаборатории аналитического качества определения общей амилазы в сыворотке крови и рассчитав сигму, которая равна 5,18, устанавливаем требования к качеству на базовом уровне. Для этого оцениваем следующие статистичекие показатели:

 

a)                CVмакс<0,5*CVi. Подставив наши данные, получаем, что CVмакс=0,5*8,7=4,35. Наш внутрилабораторный CV(%)=2,7%, что соответствует базовым требованиям к качеству определения общей амилазы в сыворотке крови.

b)                Bмакс<0,25* √(CVi2+CVG2). Вмакс для базового уровня качества определения общей амилазы в сыворотке крови соответствует 7,4. Наше смещение не выходит за пределы смещения (В(%)), установленных с учетом базовых требований к качеству.

c)                 TEa<1,65*(0,5*CVi)+0,25*√(СVi2+CVG2). ТЕа для базового уровня качества определения общей амилазы в сыворотке крови соответствует 14,6. Наше ТЕа=9.54, что соответствует базовым требованиям к качеству определения общей амилазы в сыворотке крови

 

7.2 Внесем все полученные данные в таблицу № 3.

Таблица № 3

 

Сравнительная таблица достигнутого аналитического качества на базовом уровне требования к качеству определения общей амилазы в сыворотке крови с мировыми рекомендациями базы данных Ricos C по биологической вариации качества на базовом уровне требования к качеству.

Название аналита

Оценка достигнутого требования к качеству на базовом уровне

Дифференцированные биологически обоснованные критерии точности в соответствии с базовыми требованиями к качеству

CV(%)

B(%)

TEa(%)

Sigma

CVi(%)

B(%)

TEa(%)

 

Общая амилаза в сыворотке

2,75

0,6

9,54

5,18

4,36

7,4

14,6

 

           8. Оценка результатов сигмаметрии и планирование проведения ВКК.

 

 

        Наша Sigma равна 5,18. Поэтому для проведения ВКК выбираем  запрещающее правило 12,5S для двух уровней контрольного материала, анализируемых ежедневно.

 

1. Выбор системы внешней оценки качества (ВОК).

   В соответствии с рекомендациями по выбору ВОК, описанные в учебном пособии Мошкина А. В. (А. В. Мошкин, В. В. Долгов «Обеспечение качества в клинической лабораторной диагностике», М.2004,-с.117-118), мы выбрали EQAS (External Quality Assurance Services, Внешнее служба обеспечения качества), Clinical Chemistry (Monthly) Program (Ежемесячная программа по биохимии).

 

10. Проведение исследование биоматериала на аналитической системе.

  Исследование биоматериала на анализаторах, его калибровка проводится строго согласно инструкции производителя.

 

11. Выдача результатов.

  Решение о приемлемости результатов проведения ВКК решает врач ответственный за качество исследований. В случае получения неудовлетворительных результатов ВКК, аналитическая серия признается неприемлемой, результаты пациентов бракуются, делается запись в журнале «Регистрация отбракованных результатов внутрилабораторного контроля качества», останавливается работа аналитической системы и выясняется причина возникновения ошибки. После устранения причин, повлекших за собой возникновение данной ошибки, измерение контрольного материала и образцы пациентов повторяются.

  Алгоритм выдачи бланка-ответа пациента лабораторией описан в соответствующей СОП.

 

 

 

Приложение № 1

 

Верификационный протокол согласно CLSI EP15-A2 общей амилазы на биохимическом модуле С 501 анализатора С6000 фирмы Roche.

 

CLSI EP15-A2 Precision  

Parameter

Amylase

 

 

Number of replicates

3

 

Level

1

 

 

Number of days

5

 

Operator

 

 

 

Date

Rep 1

Rep 2

Rep 3

Run Mean

Run SD

Variance

05.06.2014

83,00

83,00

82,00

82,667

0,577

0,333

06.06.2014

83,00

83,00

84,00

83,333

0,577

0,333

09.06.2014

82,00

84,00

84,00

83,333

1,155

1,333

10.06.2014

84,00

84,00

84,00

84,000

0,000

0,000

11.06.2014

84,00

84,00

84,00

84,000

0,000

0,000

Calculation of

Laboratory SD and CV

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Overall mean 

Average Е5:Е9

 

 

83,467

 

 

Within run variance (Vr)

Average G5:G9

 

 

0,400

 

 

Within run SD

SQRT (Е14)

 

 

0,632

 

 

Between run SD

SD (Е5:E9)

 

 

0,558

 

 

Between run variance (Vb)

E16*E16

 

 

0,311

 

 

Ratio Vr\Vb

E14/E17

 

 

1,286

 

 

Total Variance

((B2-1)/B2)*E14+E17

 

 

0,578

 

 

Laboratory SD

SQRT (Е19)

 

 

0,760

 

 

Laboratory CV

(E20/E13)*100

 

 

0,911

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Calculation of Т

 

 

 

 

 

 

(n-1)Vr

 

 

 

0,800

 

 

nVb

 

 

 

0,933

 

 

Sum А24+A25

 

 

 

1,733

 

 

Square (А24+A25)

Num

 

 

3,004

 

 

(n-1)/D

 

 

 

0,400

 

 

(n-1/D)*VrКВ2

 

 

 

0,064

 

 

nКВ*(VbКВ)\(D-1)

 

 

 

0,218

 

 

Sum А29+A30

Den

 

 

0,282

 

 

T

Num/Den

 

 

10,66

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Calculation of

Verification Value (VV)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Specification (S claim)

 

 

 

1,09

 

 

% Points (С)

 

 

 

11,14

 

 

Eff.Deg. of Freedom (Т)

 

 

 

10,66

 

 

SQRT (E37)

 

 

 

3,34

 

 

SQRT (E38)

 

 

 

3,27

 

 

VV E39/E40*Sclaim(E36)

 

 

 

1,12

 

 

 

 

 

 

 

 

 

S claim Calculator

 

 

 

 

 

 

CV

1,3

 

 

 

 

 

Mean

84

 

 

 

 

 

S claim

1,09

 

 

 

 

 

 

 

 

Приложение №2

 

Три уровня требований к аналитическому качеству на основе биологической вариации

 

 

минимальный

приемлемый

оптимальный

CVmax<0,75*CVi

CVmax<0,5*CVi

CVmax<0,25*CVi

Bmax<0,375*√CVi2+CVG2

Bmax<0,5*√CVi2+CVG2

Bmax<0,125*√CVi2+CVG2

TEa<1,65*(0,75*CVi)+

+0,375*√СVi2+CVG2

TEa<1,65*(0,5*CVi)+0,25* √СVi2+CVG2

TEa<1,65*(0,25*CVi)+0,125* √СVi2+CVG2

 

 

 

CVI – коэффициент внутрииндивидуальной биологической вариции

СVG – коэффициент межиндивидуальной биологической вариации

Вмакс – целевое значение смещения

CVмакс – целевое значение коэффициента общей аналитической вариации